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            ELISA檢測試劑盒的17個操作技巧你知道幾個

            發布時間:2021-10-23      點擊次數:236
             
              ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測,自從60-70年代問世以來,得到科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。為了保證ELISA試劑盒實驗質量,我們需要掌握一些小技巧以助于實驗的成功,那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎?
             
              ELISA檢測試劑盒的17個相關操作技巧如下:
             
              1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
             
              2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
             
              3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
             
              4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
             
              5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。
             
              6.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
             
              7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
             
              8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。
             
              9.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
             
              10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
             
              11.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
             
              12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
             
              13.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
             
              14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
             
              15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
             
              16.吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
             
              17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
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